細(xì)胞介紹

華雅干細(xì)胞提供的人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞是P1代的凍存細(xì)胞，或者P1\P2代復(fù)蘇細(xì)胞，可為用戶量身定制。該細(xì)胞取自滿月自然分娩的胎兒臍帶，采用無血清人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞培養(yǎng)基純化培養(yǎng)，凍存細(xì)胞每支含量為≥2.2×10⁶個，復(fù)蘇細(xì)胞每T-25含量≥1.5×10⁶。該細(xì)胞無支原體、病毒、細(xì)菌等外源性微生物污染；內(nèi)毒素指標(biāo)符合行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)；具有良好的增殖和分化能力，可以培養(yǎng)多代并維持未分化狀態(tài)；可附帶干細(xì)胞表面標(biāo)記物流式鑒定報告及相應(yīng)病原微生物檢測報告。

貨號

HUMSC-01；HUMSC-02A/B；HUMSC-03A/B

規(guī)格

按需定制

培養(yǎng)基

無血清培養(yǎng)基或常規(guī)培養(yǎng)體系

運輸

干冰/特制運輸體系

細(xì)胞特征

細(xì)胞鏡下觀察：細(xì)胞貼壁, 長成梭形，有些細(xì)胞排列呈魚貫狀相連，間有旋禍狀排列。經(jīng)過測試具備間充質(zhì)干細(xì)胞的性能特征，具有良好的增殖和分化潛能，可分化為成骨細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、軟骨細(xì)胞等。

質(zhì)量控制

嚴(yán)格的細(xì)菌、真菌、病毒（HIV、HBV、HCV）、支原體檢測，可附第三方檢測報告。

培養(yǎng)條件

37℃，5% CO₂，PH值7.2~7.4，無菌恒溫培養(yǎng)。

用途

本產(chǎn)品僅供科研。

相關(guān)操作

細(xì)胞復(fù)蘇

1.把HUMSC培養(yǎng)基放入37℃水浴中預(yù)熱；

2.從液氮中取出HUMSC迅速放入37℃水浴快速解凍（解凍后不要繼續(xù)孵育細(xì)胞）；

3.在超凈臺中加入5ml的HUMSC培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，1000rpm離心5min；

4.棄上清，加入5ml的HUMSC培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，轉(zhuǎn)移到T-25培養(yǎng)瓶；

5.將培養(yǎng)瓶置于37℃，5% CO₂的無菌恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

6.第二天，用新鮮的HUMSC培養(yǎng)基給細(xì)胞換液。

傳代培養(yǎng)

1.在顯微鏡下觀察細(xì)胞，當(dāng)細(xì)胞融合度至80%時，即可傳代；

2.37℃水浴預(yù)熱培養(yǎng)基；

3.在超凈臺中，棄掉T-25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，加入2ml PBS清洗，再加入1ml 0.25%胰酶-EDTA消化細(xì)胞；

4.在顯微鏡下觀察到細(xì)胞變圓，有細(xì)胞開始脫離瓶壁時，即可加入5ml培養(yǎng)基終止消化；

5.用移液器輕輕吹打瓶壁上剩余的細(xì)胞，并輕輕吹打?qū)⒓?xì)胞吹散；

6.將細(xì)胞轉(zhuǎn)移到15ml離心管中，1200rpm離心4min；

7.棄上清，加入15-20ml的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞后轉(zhuǎn)入T-75細(xì)胞培養(yǎng)瓶中或按適當(dāng)比例傳到 T-25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中。確保細(xì)胞貼壁后融合度在25-50%之間，細(xì)胞密度在1×104 cells/cm2 (2.5×105 cells/T-25 瓶），混合細(xì)胞懸液，確保細(xì)胞均勻分布；

8.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶置于37℃，5% CO2的無菌恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

9.每兩天用新鮮、預(yù)熱的培養(yǎng)基進(jìn)行換液。

細(xì)胞凍存

1.細(xì)胞消化和計數(shù)，用胰酶對待凍存的細(xì)胞進(jìn)行消化，并對細(xì)胞進(jìn)行計數(shù)。

2.1200rpm離心4分鐘，去掉上清。

3.根據(jù)細(xì)胞計數(shù)的情況，加入適量的凍存液，使細(xì)胞密度在1×106/ml左右（或根據(jù)自己希望達(dá)到的細(xì)胞密度）。

4.輕輕地重懸細(xì)胞，將重懸的細(xì)胞按等份加入到滅菌的凍存管（需提前做好標(biāo)記或者貼上標(biāo)簽）中，旋緊凍存管蓋。

5.將凍存管放入程序降溫凍存盒中，然后將凍存盒直接放入-80℃。

6.第二天將細(xì)胞從-80℃轉(zhuǎn)移到液氮中。

提示：細(xì)胞培養(yǎng)方案及涉及到的所有試劑耗材，可統(tǒng)一匹配，具體詳情，可在線咨詢。

相關(guān)產(chǎn)品：

血清

血清替代品

基礎(chǔ)培養(yǎng)基

無血清培養(yǎng)基

細(xì)胞因子

流式抗體

培養(yǎng)瓶

移液管

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